基础医学

人肝脏凝血因子Ⅺ的原核表达及其兔多克隆抗体的制备

作者:杨俊岭 整理 来源:医学论坛网 日期:2015-05-19
导读

           近期,哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室研究人员发表论文,旨在利用原核表达系统表达人肝脏凝血因子Ⅺ(coagulationfactorⅪ,F11)蛋白,并制备F11的兔多克隆抗体。研究指出,成功制备了F11重组蛋白及F11兔多克隆抗体,为进一步研发F11诊断试剂打下了基础。该文发表在2014年第02期《哈尔滨医科大学学报》杂志上。   从cDNA文库中筛选并扩增F11基因,将其分别与带有H

  近期,哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室研究人员发表论文,旨在利用原核表达系统表达人肝脏凝血因子Ⅺ(coagulation factorⅪ,F11)蛋白,并制备F11的兔多克隆抗体。研究指出,成功制备了F11重组蛋白及F11兔多克隆抗体,为进一步研发F11诊断试剂打下了基础。该文发表在2014年第02期《哈尔滨医科大学学报》杂志上。

  从cDNA文库中筛选并扩增F11基因,将其分别与带有HIS标签的pET-32a及GST标签pGEX-4T-1载体连接,获得表达质粒,将表达质粒转入BL21菌中表达F11融合蛋白(分别含有HIS、GST-Tag),通过SDS-PAGE进行鉴定。获得的F11融合蛋白经纯化后作为免疫原及检测原,制备兔多克隆抗体,Western blot分析获得的兔多克隆抗体的特异性。

  成功构建pET-32a-F11、pGEX-4t-1-F11表达质粒,获得两种标签的融合蛋白。将重组蛋白纯化后作为免疫原免疫兔,取得了能与重组蛋白特异性结合的兔血清。

   相关链接:http://med.wanfangdata.com.cn/Periodical/hebykdxxb

  

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