 (续2008年4月17日C11版)
结果
高同型半胱氨酸血症诱导血管内皮功能障碍
我们对实验大鼠采用蛋氨酸灌胃4 w,诱导高同型半胱氨酸血症。其血浆血管性血友病因子(vWF)水平显著升高,一氧化氮(NO)水平降低,内皮依赖性血管舒张功能显著降低,提示血管内皮功能受损,大鼠内皮功能障碍模型复制成功。
通心络改善大鼠凝血功能
与对照组比较(表1、表2,见4月17日C11版),模型组在注射角叉莱胶(Ca)前,活化部分凝血活酶时间(APTT)缩短,而在注射联合脂多糖(LPS)20 h后,APTT时间显著延长、纤维蛋白原(Fg)含量显著减少,血小板计数也显著小于对照组。研究提示:模型组在注射LPS 20 h后体内广泛微血栓形成,血液处于消耗性低凝状态。
通心络组与对照组比较(表1、表2,见4月17日C11版),在注射Ca前,APTT时间显著延长,而在注射LPS 20 h后,APTT时间与正常组比较无显著差异;Fg含量在注射Ca前,与对照组比较明显减少,在注射LPS 20 h后,与模型组比较显著增多,血小板计数虽仍然显著小于对照组,但显著大于模型组。研究提示:通心络可以减轻LPS 的毒性作用,有效推迟并阻止LPS 启动凝血的过程。
通心络降低全血比黏度改善肠系膜微循环
模型组全血比黏度(WBV)高、低切均显著高于对照组,而通心络组WBV高、低切虽显著高于对照组,但均显著低于模型组(表3)。
镜下可见模型组毛细血管甚至小血管阻塞,血管边缘模糊,血管周围弥漫性、片状渗血或大片瘀血,血液流态异常,颗粒感明显,呈粒缓流或粒摆流,红细胞呈中、重度聚集。通心络组观测肠系膜微循环,可见血流速度明显加快,偶见瘀血,无渗血,基本无红细胞聚集现象。采用微血管流态半定量法测定流态分级计分值(表4)。
讨论
络病与心脑血管疾病有着密切的相关性。络病的形成是由气到血、由功能病变到器质损伤的慢性病理过程,络气虚滞是这一病变的起因。络气不仅推动血液在脉络中运行,而且维持着脉络的正常功能状态。络脉是从经脉中支横别出,逐层细分的网络,络脉中运行的是血液。络脉包括现代医学从大血管依次分出的中、小血管等各级血管,更多的是指小血管和微血管。络气损伤、络脉的自稳和调节功能失常招致多种致病因素,如瘀血阻络、痰湿阻络、寒凝络脉等。络脉瘀阻是在络气虚滞的基础上发展而来的由功能性病变发展为器质性损伤的重要病程阶段,并且从小动脉、微动脉及微循环的“黏”、“稠”、“凝”、“滞”等方面考虑,因此,络脉瘀阻的动物模型应该考虑在血管内皮损伤的基础上,建立广泛的微血栓形成模型,以便更好的反映络脉瘀阻的病理变化。
血管内皮不仅具有屏障功能,而且具有重要的信息传递和内分泌功能,其中NO是血管内皮所合成分泌的最重要的血管活性物质。NO具有扩张血管,抗血小板黏附聚集,抗血管平滑肌细胞增生等作用。vWF是一种多聚糖蛋白,是血小板黏附于受损血管壁不可缺少的蛋白,可促进血小板的黏附与聚集。血管内皮细胞受损后,vWF大量释放入血,血浆vWF含量增高,促进血小板黏附与聚集,并且vWF分子量较大,其升高还可导致血液黏度增加,形成血小板血栓,促进血栓的形成。故vWF水平随内皮损伤程度的加重而增加,与血栓的形成密切相关。我们既往的研究表明,高同型半胱氨酸血症能抑制内皮依赖性的血管舒张功能,降低血浆NO水平,提高血浆vWF水平,证实高同型半胱氨酸血症造成了大鼠血管内皮损伤及功能障碍。
LPS是革兰阴性菌的主要表面成分,在血栓形成中扮演着非常重要的角色。目前注射LPS多用于复制感染性损伤模型,多给予较大剂量的静脉注射,而本试验考虑在大鼠内皮损伤基础上建立广泛微血栓形成模型,故选择诱导剂量Ca注射后,使用小剂量LPS腹腔注射,既造成炎症反应后的微血栓形成,又确保动物的存活率。结果显示,给予模型组大鼠注射LPS 20h检测凝血指标,其中APTT延长、Fg含量减小,血小板计数减少,说明由于广泛的微血栓形成造成大量凝血因子及血小板消耗,导致血液处于消耗性低凝期。血液浓缩,血液黏度增高,肠系膜微循环瘀血、血栓情况严重,可见大片瘀血及渗血,血流速度缓慢、流态异常。络脉瘀阻动物模型成功建立。
使用通心络超微粉干预该络脉瘀阻模型,可显著降低全血比黏度,保护内皮细胞,改善血液流变,还可显著增加血小板计数,在微血栓形成过程中抑制血小板聚集,减少血栓形成对血小板的消耗;在注射LPS前检测凝血指标,APTT时间较正常组延长,而Fg含量却显著减少,表明通心络超微粉可能是通过减少Fg在肝脏的合成,而具有一定的抗凝作用。其机制有待进一步探讨。在注射LPS 20 h后,APTT时间保持在正常水平,而Fg含量较模型组明显增加,提示通心络超微粉减轻了LPS 的毒性作用,有效推迟并阻止了LPS 启动凝血过程的病理生理作用,进一步证实了通心络超微粉可以有效阻止微血栓形成,起到保护血管内皮和改善微循环障碍的作用。
综上所述,建立络脉瘀阻大鼠模型,以研究通心络防治络脉瘀阻的作用,方法简单易行、结果稳定可靠,并且基本符合络病的重要病理变化“络脉瘀阻”的发生发展过程。通过通心络超微粉对该模型的干预可以看出,通心络超微粉可有效保护血管内皮,防止体内广泛微血栓形成,有效改善微循环障碍,是防治心血管疾病的有效中药制剂,对临床用药具有重要指导价值。(参考文献从略)
(叶子 整理)
表3 注射脂多糖20小时后全血比黏度结果(X±S,n=7)
| 分组 |
WBV(mPa s) |
| 比黏度高切(20s-1) |
比黏度低切(80s-1) |
| 对照组 |
3.052±0.209 |
5.209±0.375 |
| 模型组 |
5.520±0.289** |
6.992±0.296** |
| 通心络组 |
3.839±0.140** |
6.030±0.213**## |
|
WBV:全血比黏度。
与对照组比较:**P<0.01,与模型组比较:##P<0.01。 表 4 通心络超微粉对大鼠肠系膜微循环血液流态的改善(X±S)
| 分组 |
n |
1~3级 |
3~5级 |
5~7级 |
计分值 |
| 对照组 |
10 |
10 |
0 |
0 |
1.54±0.398 |
| 模型组 |
10 |
0 |
3 |
7 |
5.29±0.709** |
| 通心络组 |
10 |
4 |
6 |
0 |
3.02±0.503**## |
|
与对照组比较:**P<0.01,与模型组比较:##P<0.01。 该研究在第三届国际络病学大会上由吴以岭教授报告 |
