 摘要
目的 探讨气虚和气滞型血管内皮损伤相关的炎症、氧化应激等7组基因表达谱的异同及通心络对基因表达谱的影响。
方法 用高L-蛋氨酸复制SD大鼠血管内皮损伤,并附以负重游泳法和束缚法分别制造气虚和气滞症实验模型。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和美国国立生物技术信息中心(NCBI)提供的SAGE(serial analysis of gene expression)数据库及在线工具,分析气虚和气滞型内皮损伤相关的炎症、氧化应激等7组基因表达谱的变化,以及通心络对基因表达谱的影响。
结果 与正常组相比,气虚组炎症相关环氧合酶1(COX-1)、COX-2,氧化应激相关一氧化氮合酶(iNOS)、超(过)氧化物歧化酶(SOD)及血管舒缩相关人内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、内皮素转换酶(ECE)基因的表达均显著升高(P<0.05或P<0.01),前列腺素环氧合酶(PCS)基因表达变化无统计学差异,通心络治疗后这些基因的表达降低(P<0.05或P<0.01)。气滞组COX-1、COX-2、 iNOS、eNOS及ECE基因表达亦显著升高(P<0.01),PCS和SOD基因表达显著下降(P<0.01),通心络治疗后这些异常表达的基因趋于正常(P<0.01)。
结论 气虚和气滞型血管病变中,内皮损伤7组相关基因表达谱不尽相同,而通心络能改善其基因表达谱的异常,从而起到保护血管内皮免受损伤的作用。
通心络胶囊是依据中医络病理论研制而成的中药复方制剂(国药准字Z19980015),由人参、水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣等配伍而成,具有活血益气、通络止痛的功效,对防治血管病变有良好的效果[1],但通心络的内在作用机制尚未完全明了。
血管内皮细胞损伤在动脉粥样硬化(AS)的发生发展过程中起重要作用[2]。导致内皮细胞损伤的炎症和氧化应激学说已引起普遍重视[3]。为进一步探讨气虚和气滞型血管病变中,炎症和氧化应激相关基因在内皮细胞损伤中的表达状况及通心络对其表达谱的影响,我们利用SAGE数据库从信息学角度分析其相关基因表达谱,并采用半定量RT-PCR方法检测气虚、气滞及通心络治疗情况下基因谱的表达水平,从而探讨和比较气虚型与气滞型血管内皮损伤相关基因表达谱的异同及通心络对基因表达谱的影响。
材料与方法
实验动物
健康雄性SD大鼠,清洁级,体重200~250 g,由河北省实验动物中心提供(合格证书:冀医动管字04259号)。
主要仪器、药品与试剂
圆形游泳缸(直径25 cm、高60 cm),自制夹具(松紧度可据动物情况调整),480型基因扩增仪(美国PE公司),H-7500透射电子显微镜(日立公司),L-蛋氨酸(石家庄市维诺伟业生物制品有限公司),通心络(以岭药业有限公司),RT-PCR试剂盒(Promega),引物由上海生工合成,其余试剂均为国产分析纯。(未完待续)
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